昨天我们一起探讨了如何写关于miRNA的主题发2到3分的文章，那相同的套路是否可以发更高水平的文章呢？今天小编就举例对比一下，如何做类似的实验发更高影响因子的文章。
这篇文章被影响因子为5.5分的 Cell. Physiol. Biochem.期刊所接收，文章中，作者对已知的MicroRNA-224分子进行了研究，并得出结论：MicroRNA-224靶向TXNIP基因介导的HIF1α通路可促进胰腺癌细胞的增殖和迁移。
很熟悉有木有！与昨天分析的文章做的是类似的实验有木有！
下面我们来看看该研究中作者都做了什么，分析与上一个研究有何不同之处。
材料：
同样的，研究人员从美国机构（ATCC和Kelafast）购买了Panc1、Miapaca2、AsPc-1、Panc02、CFPAC1胰腺导管腺癌（PDAC）细胞系和hTERT-HPNE、H6c7正常胰腺细胞系进行培养。除此之外，研究者还在医院采集了49对病人的PDAC组织及其相应的癌旁非肿瘤标本进行临床实验。
相比上一个研究，该实验中作者购买的细胞系增多，这增加了研究人员的工作量，但是相应的，这也更具有统计学意义，得出的实验结果可信度也较高，另外，在临床实验中作者采集病变组织的同时还采集了相应的癌旁非病变组织，这个对照组设置相比上一个研究则避免了更多的其他差异因素，消除了更多的无关变量对实验结果的影响，更加客观可信。
方法：
从公司购买miR224模拟物，miR224抑制剂，PCDN3.1-TxNIP，和靶向TXNIP和HIF1α的小干扰RNAs（siRNA），用qRT-PCR方法检测miR224或miR 224抑制剂过表达的水平，Western blotting和免疫荧光法检测蛋白的表达情况，使用BrdU掺入法检测细胞增殖，MTT法测定细胞存活率，使用Transwell系统检测细胞迁移，荧光素酶检测基因的表达。
在方法运用方面，相比上一个研究，作者采用了更多的实验方法来论证提出的观点，例如用BrdU掺入法检测细胞增殖，又采用免疫荧光法检测蛋白的表达情况，这些方法都增加了实验结果的可信度，也是发表文章的加分项啊有木有！
并且，除了临床实验和细胞实验，作者又设计了另外的动物实验，建立了转移性的小鼠模型来进一步验证实验结果的准确性和可实用性！
结果：
miR224在胰腺癌临床组织和细胞中的表达上调：在临床实验中，用qRT-PCR检测miR224的表达水平发现在胰腺癌组织中miR224水平显著高于癌旁组织（P＜0.001）；与非侵袭性组织相比，侵袭性胰腺癌组织中miR224明显上调（P＜0.01）。
在细胞实验中，所有五个胰腺癌细胞系中，与正常细胞系相比，miR224的水平显著增加。
miR224促进PDAC癌细胞增殖和迁移无论在临床实验还是细胞实验亦或动物实验中，结果均表明miR224刺激PDAC癌细胞的生长和迁移。
XNIP是PDAC细胞miR224的直接靶点检测蛋白表达实验和荧光素酶活性实验的结果证明了TXNIP是PDAC细胞中miR 224的靶点。
相比上一个研究，验证了miR224的直接靶点基因后，该研究中作者又做实验对miR224 调控TXNIP基因的通路机制进行验证，结果表明miR224通过下调TXNIP增加HIF1α的水平和活性，这是PDAC细胞生长和迁移的必要条件。
至此该研究就已完成，那大家有没有发现还有哪里可以作为该文章的加分项呢？对的，就是图片了，相比上一篇文章，该文章的图片是不是更加美观，高大上呢？套路，都是套路啊！
你们有什么好的想法（tao lu）呢？可以在评论区留言，大家一起来学习！
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