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干货 │ 步步为赢，ChIP实验攻略


导读

染色质免疫沉淀（Chromatin Immunoprecipitation，ChIP）作为研究体内DNA与蛋白质相互作用的金标准，对于基因表达调控研究具有重要意义。但是，实验汪们在操作的过程中总是被虐的体无完肤，糟心的实验结果更是让实验汪们分分钟想去“狗带”，有多虐心就有多少需要注意的地方。好的经验要分享，小编特地总结了高手做ChIP的经验，在此奉上，希望能助大家一臂之力。


ChIP原理及应用

在活细胞状态下，使用甲醛将蛋白质-DNA复合物进行固定，并通过超声或酶切将染色质打断为一定范围内的小片段，随后用抗体特异性识别抗原，特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段，然后对DNA片段进行纯化与检测（如qPCR，基因芯片，高通量测序等）。ChIP广泛应用于检测转录因子与DNA的动态结合，组蛋白各种共价修饰与基因表达的关系。

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细胞固定

内源状态下，蛋白质和DNA的结合多数是动态的，因此需要进行固定以捕获特定状态下蛋白和DNA的结合情况，最常用的固定试

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