流式细胞术原理

流式通道

散射通道

FSC通道
FSC，即前向角散射，它的值代表细胞的大小。所以可以利用细胞的FSC值初步比较细胞的大小，利用FSC值对细胞进行分群和分类。

SSC通道
SSC，即侧向角散射，它的值代表细胞的颗粒度（granularity）。细胞越不规则，细胞表面的突起越多，细胞内能够引起激光散射的细胞器或者颗粒性物质越多，其SSC值就越大。所以可以利用细胞的SSC值初步比较细胞的颗粒度，利用SSC值对细胞进行分群和分类。

荧光通道

检测样品中是否含有细胞表达某一CD分子——标记荧光素偶联的该CD分子的抗体——表达有该CD分子的细胞就会结合荧光素偶联抗的该CD分子的抗体——荧光素被相应的激光激发后产生荧光——荧光通道值反映接收到的荧光信号的强弱，——反映细胞上结合的荧光素的量，反映细胞上表达该CD分子的量——间接反映细胞表达某CD分子这一化学特征
不同细胞群的FSC值和SSC值最多相差几倍，而荧光信号强弱之间一般相差很大，阴性细胞与阳性细胞之间、强阳性与弱阳性之间有时可以相差几十倍、几百倍，甚至几千倍，呈指数关系。 流式图数轴上FSC值和SsC值以“一般数序形式”表示，而荧光通道值常以“对数形式”（logarithmic scale）表示

流式直方图

流式直方图的x轴表示一个通道的值,y轴表示细胞数量。

流式散点图

流式直方图只能表示一个通道的信息，而流式散点图能够同时表示两个通道的信息，可以非常直观地发现细胞群体中这两个通道值的相互高低关系，从而更易于细胞分群、分类，以及确定比例关系等。
流式散点图也是采取坐标轴的方式，x轴表示一个通道的值，y轴表示另一个通道的值，图中每一点代表一个细胞，该点所对应的横坐标值就是该点所代表细胞的x轴通道的值，所对应的纵坐标值就是该点所代表细胞的y轴通道的值。

流式等高线图

环线聚集越多的地方表示此区域细胞密度变化越快，细胞最稀疏的地方还是用散点表示，环线的中央区域代表细胞聚集的中心
流式等高线图比流式散点图更能直观地体现细胞的分群。

reference
https://www.jianshu.com/p/c0be133bd645