亚细胞定位(Subcellular Localization)

亚细胞定位是研究基因功能不可或缺的一种技术手段,可将某种蛋白或者表达产物定位于细胞中的具体位置,如细胞核内、各种细胞器以及质膜(plasma membrane)上,从而为理解基因的作用机制提供研究方向。目前研究亚细胞定位最常用的是融合报告基因定位法。

成熟蛋白质必须在特定的亚细胞器里面才能发挥稳定的生物学功能。同时也只有在相同或相近的亚细胞位置上蛋白质间才会有相互作用。为准确了解某种蛋白功能,除需对其蛋白结构进行分析外,通常还需清楚其亚细胞定位,以此判断其发挥功能的可能场所。蛋白质亚细胞定位对研究蛋白质的功能非常重要。
亚细胞定位是指某种蛋白或者是某个基因的表达产物在细胞内的具体存在部位基因的表达调控体现在蛋白质的结构和功能方面,只有蛋白质定位正确,才可以行驶正常的生物学功能。通过实验方法对蛋白质的亚细胞定位研究,主要借助于绿色荧光蛋白GFP报告基因将目的基因和报告基因融合在一起,构建融合基因表达载体,转化到合适的细胞,利用目的基因的表达调控机制,最终得到融合蛋白。在扫描共聚焦显微镜的激光照射下会发出绿色荧光,从而可以精确地定位蛋白质的位置。
此外,可通过生物信息学手段预测蛋白亚细胞位置,但生物信息学预测还需要通过试验手段加以验证,常见的定位预测网站如PROST等,都可作为辅助研究蛋白定位的手段。
Reference:
马铃薯StCRK1和StCRK1亚细胞定位及其互作蛋白的初步筛选

你可能感兴趣的:(亚细胞定位(Subcellular Localization))