现在有18个sample(样品)的DNA序列,然后有一个对比序列ref,我们的任务就是对照ref序列,从18个sample中提取出SNP位点。
事情的详细步骤如下:
1.首先利用lastz把每一个样品进行对比,从中找出配匹的大片段。这个过程需要用的是lastz的用法和perl中系统命令。
关于lastz,用法可以用google "lastz",或者直接到http://www.bx.psu.edu/miller_lab/dist/README.lastz-1.02.00/README.lastz-1.02.00a.html这里去看。
使用之前还是要慢慢的看一看的。
然后我们用一个perl程序,处理所有的18个样品,程序如下:
#!/usr/bin/perl use strict; use warnings; system 'lastz TAIR10_chr5.fas bur_0.v7.PR_in_lowercaseDNA5.txt --ambiguous=iupac --notransition --step=20 --nogapped --format=maf >TAIR_vs_bur.maf'; system 'lastz TAIR10_chr5.fas can_0.v7.PR_in_lowercaseDNA5.txt --ambiguous=iupac --notransition --step=20 --nogapped --format=maf >TAIR_vs_can.maf'; system 'lastz TAIR10_chr5.fas ct_1.v7.PR_in_lowercaseDNA5.txt --ambiguous=iupac --notransition --step=20 --nogapped --format=maf >TAIR_vs_ct.maf'; system 'lastz TAIR10_chr5.fas edi_0.v7.PR_in_lowercaseDNA5.txt --ambiguous=iupac --notransition --step=20 --nogapped --format=maf >TAIR_vs_edi.maf'; system 'lastz TAIR10_chr5.fas hi_0.v7.PR_in_lowercaseDNA5.txt --ambiguous=iupac --notransition --step=20 --nogapped --format=maf >TAIR_vs_hi.maf'; system 'lastz TAIR10_chr5.fas kn_0.v7.PR_in_lowercaseDNA5.txt --ambiguous=iupac --notransition --step=20 --nogapped --format=maf >TAIR_vs_kn.maf'; system 'lastz TAIR10_chr5.fas ler_0.v7.PR_in_lowercaseDNA5.txt --ambiguous=iupac --notransition --step=20 --nogapped --format=maf >TAIR_vs_ler.maf'; system 'lastz TAIR10_chr5.fas mt_0.v7.PR_in_lowercaseDNA5.txt --ambiguous=iupac --notransition --step=20 --nogapped --format=maf >TAIR_vs_mt.maf'; system 'lastz TAIR10_chr5.fas no_0.v7.PR_in_lowercaseDNA5.txt --ambiguous=iupac --notransition --step=20 --nogapped --format=maf >TAIR_vs_no.maf'; system 'lastz TAIR10_chr5.fas oy_0.v7.PR_in_lowercaseDNA5.txt --ambiguous=iupac --notransition --step=20 --nogapped --format=maf >TAIR_vs_oy.maf'; system 'lastz TAIR10_chr5.fas po_0.v7.PR_in_lowercaseDNA5.txt --ambiguous=iupac --notransition --step=20 --nogapped --format=maf >TAIR_vs_po.maf'; system 'lastz TAIR10_chr5.fas rsch_4.v7.PR_in_lowercaseDNA5.txt --ambiguous=iupac --notransition --step=20 --nogapped --format=maf >TAIR_vs_rsch.maf'; system 'lastz TAIR10_chr5.fas sf_2.v7.PR_in_lowercaseDNA5.txt --ambiguous=iupac --notransition --step=20 --nogapped --format=maf >TAIR_vs_sf.maf'; system 'lastz TAIR10_chr5.fas tsu_0.v7.PR_in_lowercaseDNA5.txt --ambiguous=iupac --notransition --step=20 --nogapped --format=maf >TAIR_vs_tsu.maf'; system 'lastz TAIR10_chr5.fas wil_2.v7.PR_in_lowercaseDNA5.txt --ambiguous=iupac --notransition --step=20 --nogapped --format=maf >TAIR_vs_wil.maf'; system 'lastz TAIR10_chr5.fas ws_0.v7.PR_in_lowercaseDNA5.txt --ambiguous=iupac --notransition --step=20 --nogapped --format=maf >TAIR_vs_ws.maf'; system 'lastz TAIR10_chr5.fas wu_0.v7.PR_in_lowercaseDNA5.txt --ambiguous=iupac --notransition --step=20 --nogapped --format=maf >TAIR_vs_wu.maf'; system 'lastz TAIR10_chr5.fas zu_0.v7.PR_in_lowercaseDNA5.txt --ambiguous=iupac --notransition --step=20 --nogapped --format=maf >TAIR_vs_zu.maf';
--ambiguous=iupac 大致的意思就是可以忽略不同的碱基,我们都知道DNA的类型只有四种,但是却有很多不确定的情况,就像R可以代表的就是A,G中的一种,因为测序的原因,我们无法准确的确定。你可以google“核酸代码”或者直接到http://blog.csdn.net/gaorongchao1990626/article/details/8208533这个网址里去看。
后面的大家自己去lastz的网站去看,然后--format=maf确定的输出文件的类型,>TAIR_vs_bur.maf是输出到TAIR_vs_bur.maf的文件。