Kamiya丨Kamiya艾美捷小鼠转铁蛋白ELISA说明书

Kamiya艾美捷小鼠转铁蛋白ELISA预期用途：

小鼠转铁蛋白ELISA是一种高灵敏度的双位点酶联免疫分析（ELISA）小鼠生物样品中转铁蛋白的测定。仅供研究使用。

引言

转铁蛋白是一种金属结合蛋白，可逆地与血浆中的酸溶性铁结合。它的功能是运输铁到骨髓和组织储存器官，如肝脏。转铁蛋白也参与调节和控制铁的吸收并防止铁中毒。与触珠蛋白一样，血红蛋白的载体，转铁蛋白是在肝脏中合成，但与触珠蛋白不同，转铁蛋白在卸载铁后返回循环网状内皮系统。该ELISA可用于测量血清，组织提取物和其他生物制剂中的转铁蛋白流体。

Kamiya艾美捷小鼠转铁蛋白ELISA原理：

在该测定中，转铁蛋白存在于样品与吸附在聚苯乙烯微量滴定表面的抗转铁蛋白抗体反应

井。通过洗涤除去未结合的蛋白质后，与辣根缀合的抗转铁蛋白抗体加入过氧化物酶（HRP）。该HRP缀合的抗体与先前结合的转铁蛋白形成复合物。在另一个洗涤步骤之后，通过添加显色剂来测定与免疫吸附剂结合的酶底物，3,3'，5,5'-TMB。结合酶的数量与浓度成正比测试样品中的转铁蛋白；因此，在450nm处的吸光度是转铁蛋白浓度的量度测试样本。测试样品中转铁蛋白的量可以从由校准品，并针对样品稀释进行校正。

Kamiya艾美捷小鼠转铁蛋白ELISA试剂制备：

1.稀释剂浓缩物

提供的稀释剂溶液是5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水1:5稀释。

2.洗涤液浓缩物

提供的洗涤溶液是20倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水按1:20稀释。水晶当储存温度低时，浓缩物中的形成并不少见。将浓缩物升温至稀释前30-35°C可溶解晶体。

3.酶-抗体缀合物浓缩物

通过添加10μL计算每个微量滴定板测试条所需的工作共轭溶液量对于用于测试的每个测试条，酶-抗体与990μL1X稀释剂缀合。均匀，但轻轻混合。避免起泡。使用前立即稀释并避光。

4.TMB底物溶液

随时可用。

5.微量滴定板

随时可用。密封微量滴定袋并从袋中取出板。去除所有会不用于测定并放回袋中并与干燥剂一起重新密封。

7.小鼠转铁蛋白校准器

向冻干的小鼠转铁蛋白校准品中加入1.0 mL蒸馏水或去离子水，轻轻混合直至溶解。校准器现在的浓度为8.70μg/mL（重组校准器应等分并如果打算将来使用，则冻结）。在每个步骤之间充分混合。避免起泡。