Kamiya丨Kamiya艾美捷马CRP ELISA说明书

Kamiya艾美捷马CRP ELISA预期用途：

马CRP ELISA是一种高灵敏度的双位点酶联免疫分析（ELISA）马生物样品中C-反应蛋白（CRP）的测定。仅供研究使用。

引言

急性期蛋白质是血浆蛋白质，其在感染，炎症或创伤后浓度增加。Tillet和Frances于1930年在人类中发现了第一个被识别的急性期蛋白。这种C反应性蛋白质（CRP）之所以如此命名，是因为它能够影响链球菌体细胞C-多糖的沉淀肺炎。CRP是一种α球蛋白，质量为110000至140000道尔顿，由五个相同的α球蛋白组成亚基，它们非共价组装成环状五聚体。它在肝脏中合成，在人体中是通常以低于0.3mg/dL的水平作为血清的痕量成分存在。血清水平在随后迅速上升急性组织损伤，一旦刺激被消除，也会迅速下降。有人提出CRP有助于补体激活，影响吞噬细胞功能，并增强细胞介导的细胞毒性。过去几年的调查表明，血浆或血清中这些的定量可以提供有价值的不仅在人类中，而且在伴侣动物和农场中检测，预后和监测疾病的信息牛群也是如此。

Kamiya艾美捷马CRP ELISA试验原理：

在该测定中，CRP存在于样品与吸附在聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗CRP抗体反应。通过洗涤除去未结合的蛋白质后，与辣根过氧化物酶（HRP）缀合的抗CRP抗体，被添加。这些酶标记的抗体与先前结合的CRP形成复合物。继另一个洗涤步骤，通过添加显色底物3,3'，5,5'来测定与免疫吸附剂结合的酶-TMB。结合酶的数量随样品中CRP的浓度直接变化测试；因此，450nm处的吸光度是测试样品中CRP浓度的量度。数量测试样品中的CRP可以从校准器构建的校准曲线内插，并进行校正样品稀释。

不稳定的迹象：

如果测试执行正确，校准解决方案观察到的结果应在预期的20%以内价值观。

标本采集和处理:

应通过静脉穿刺收集血液，并在凝块形成后通过离心将血清与细胞分离。对于血浆样本，应将血液收集到装有抗凝血剂的容器中，然后离心。小心应该采取尽量减少溶血，过度溶血会影响你的结果。立即测定或等分并储存样品在-20°C。避免反复冻融。对于任何可能含有病原体的样品，必须小心防止与开放性伤口接触。

Kamiya稀释样品：

由于测定的高灵敏度，每个样品在用于正常测定之前应该稀释。一个1:100血清或血浆的稀释适用于大多数样品。对产生结果的样本进行绝对量化在校准曲线的范围之外，可能需要更小或更大的稀释。如果不确定样本水平，a强烈建议在运行整个平板之前用一个或两个代表性样品进行连续稀释。要制备1:100稀释的样品，请将5μL样品转移至495μL1X稀释剂中。这给你一个1:100稀释。彻底混匀。