Kamiya丨Kamiya艾美捷狗CRP ELISA说明书

Kamiya艾美捷狗CRP ELISA预期用途：

狗CRP ELISA是一种高灵敏度的双位点酶联免疫分析（ELISA），用于定量测定狗生物样品中的C反应蛋白（CRP）。仅供研究使用。

引言

急性期蛋白质是血浆蛋白质，其在感染，炎症或创伤后浓度增加。Tillet和Frances于1930年在人类中发现了第一个被识别的急性期蛋白。这种CRP之所以如此命名，是因为它能够影响肺炎链球菌体细胞C-多糖的沉淀。CRP是质量为110000至140000道尔顿的α球蛋白，由五个相同的亚基组成，它们非共价组装成环状五聚体。它在肝脏中合成，并且在人体中通常以低于0.3mg/dL的水平作为血清的痕量成分存在。急性组织损伤后血清水平迅速升高，一旦刺激被消除，血清水平迅速下降。已经提出CRP的功能是帮助补体激活，影响吞噬细胞功能，并增强细胞介导的细胞毒性。过去几年的研究表明，血浆或血清中CRP的定量可以为疾病的检测，预后和监测提供有价值的信息，不仅在人类中，而且在伴侣动物和农场中也是如此。

Kamiya艾美捷狗高敏CRP ELISA原理：

在该测定中，样品中存在的CRP与已经吸附到聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗CRP抗体反应。通过洗涤除去未结合的蛋白质后，加入与辣根过氧化物酶（HRP）缀合的抗CRP抗体。该HRP缀合的抗体与先前结合的CRP形成复合物。在另一个洗涤步骤之后，通过加入显色底物3,3'，5,5'-四甲基联苯胺（TMB）测定与免疫吸附剂结合的酶。结合酶的量与测试样品中CRP的浓度成正比；因此，450nm处的吸光度是测试样品中CRP浓度的量度。测试样品中CRP的量可以从校准器构建的校准曲线内插，并对样品稀释进行校正。

Kamiya艾美捷狗高敏CRP ELISA组件：

1.稀释剂浓缩物

一瓶含有50毫升5X浓缩稀释剂缓冲液。

2.洗涤液浓缩物

一瓶装有50毫升20X浓缩洗涤液。

3.酶-抗体偶联物浓缩物

一个装有150m在稳定缓冲液中加入与HRP缀合的100倍浓缩亲和纯化的抗狗CRP抗体。

4.TMB底物溶液

 

一瓶含有12mL TMB和过氧化氢的柠檬酸缓冲液，pH3.3。

5.停止解决方案

一瓶含有12毫升0.3M硫酸。

警告：避免接触皮肤。

6.微量滴定板

在孔保持器框架中有12个可拆卸的8孔微条。孔用亲和纯化的抗狗CRP包被。

7.Dog-CRP校准器

一个小瓶含有冻干的狗CRP校准品。

8.积极控制

一个装有50mL含0.1%叠-氮-化钠的血清。请参阅浓度控制证书。