荧光PCR

1. 分装病毒

保存于进口EP管,300u 一个
封装前充分震荡保存液

2. 机提核酸

  • 准备深96孔板、试剂盒、样品300u、阳性对照(fluA、fluB)
  • 96孔板中加入:
    第一列:裂解液300u、PK10u、AC4u、磁珠10u、样本(最后加)
    第二列:Wash Buffer Ⅰ 500u (用前混匀)
    第三列:Wash Buffer Ⅱ 500u
    第四列:Wash Buffer Ⅲ 550u
    第五列:空
    第六列:Elution B 30u
  • 最后先加样品,后加阳性对照;移液枪吹吸混匀。
  • 充分反应10分钟后,上机器

3. 准备体系:25u

要分别准备fluA和fluB的体系

  • T: 5u
  • 5×buffer : 稀释至1×,也就是 5u
  • dNTP:1u
  • 引物 F: 0.2u;R:0.2u
  • probe:0.2u (现配现用,母液1:10稀释)
  • E :1u
  • 水:剩余的:12.4u

4. 上机

  • 将提取出的核酸与此前配好的体系分装入八连管中
  • 注意:不要有气泡

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