质粒载体(Plasmid Vectors)

质粒载体是在天然质粒的基础上为满足实验需求而进行人为构建的。 与天然质粒相比,质粒载体通常带有一个或一个以上的选择性标记基因(如抗生素抗性基因)和一个人工合成含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列,并去掉了大部分非必需序列,使相对分子质量尽可能减少,以便于基因工程操作。

Plasmid Vectors

质粒(Covalently Closed Circular DNA,cccDNA)。

Plasmid

质粒的基本特性

①自主复制性
--携带有自己的复制起始区(Ori)
--控制质粒拷贝数的基因
--能独立于宿主细胞的染色体DNA而自主复制
②不相容性
③可扩增性
④可转移性

质粒的组成


● 质粒的基本元件
1.复制起始区(Origin Of Replication)

一段特殊的DNA序列,是质粒自我复制所必需的,也决定了质粒的寄主范围和质粒的拷贝数。

2.选择标记基因区
抗性基因(抗生素)、颜色筛选基因
3.多克隆位点(Multiple Cloning Site,MCS)

多个限制性核酸内切酶酶切位点组成,是外源DNA的插入部位,这些位点载体上一般都只有一个。

● 质粒的特殊元件
A. 转录元件:
启动子Promoter、操纵子Operater、终止子Terminator
B. 翻译元件:
核糖体结合位点(RBS),起始密码子(ATG),起始密码子(Stop codon),表达标签(Tag)


VECTORS

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