科研汪的日常 03 混乱

进入课题组后的每一天都有新的实验要学习，从PCR到Western Blot，再到切片和免疫荧光染片，刚开始还能记得清要用的东西放在了哪里，也记得清Western Blot是用TBST(TBS+Tween20)来进行清洗，免疫荧光染片是用PBST(PBS+Triton)，后来两个实验一同进行的时候，脑子已经放弃了思考，完全就是凭手感，拿到什么用什么。

这天，当我顶着满脑袋糨糊，手拿TBST准备去洗涤免疫荧光染的脑片的时候被师姐抓了个正着：师妹，你好好看看标签！扭头看了一眼手里的瓶子，嗯，TBST，满脸疑惑地问：有什么问题么？

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师姐抹了下额头说：这两种液体虽然名字有点像，也都是无色无味的，但TBST是Western Blot过程中用来洗涤未结合的抗体提高抗体特异性的；而PBST是用来透膜，从而让染料更容易透过细胞膜，使染料对细胞的染色更充分。我们日常的实验，步骤多而繁琐，只有理解实验原理和目的后，记忆起来才会更容易。你也别着急，想明白了，看清楚了再行动也不迟的。

点头如捣蒜，然而第二天，师姐让我找PBST，我翻箱倒柜愣又拿了一瓶TBST给她，师姐欲言又止，但最终依旧告诉了我正确的溶液和位置，同时又一次给我讲了她放试剂的习惯。努力记忆着细节，但依旧感觉脑子不够用。都说好记性不如烂笔头，以后还是带个笔记本来记录实验中的小细节。

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然而，虽然有了小本本，实验区每天还是能看到我翻箱倒柜的身影，唯一的区别是每次翻箱倒柜之前都会趴在桌上翻本子。好希望这个阶段能早些结束哇！

小贴士：

1.Western Blot实验原理流程图：

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2.TBST：TBS是Tris-HCl缓冲盐溶液，为等渗盐溶液加Tris-HCl缓冲液。Tween-20：有助于防止非特异性抗体结合，提高特异性的识别能力，在Western Blot实验中作为洗涤剂，用于每次免疫反应之间的洗涤，以去除未结合的免疫学物质，并最终用于孵育免疫试剂（标记抗体）的溶液以减少非特异性背景。

3.免疫荧光实验原理

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4.PBST：PBS：磷酸盐缓冲液，一般作为溶剂，起溶解保护试剂的作用，在生物化学研究中广泛使用。Triton X-100是一种非离子型表面活性剂（或称清洁剂），它能溶解脂质，以增加抗体对细胞膜的通透性。

参考链接：

1.https://baike.baidu.com/item/%E8%9B%8B%E7%99%BD%E8%B4%A8%E5%8D%B0%E8%BF%B9%E6%B3%95/5560390?fromtitle=Western%20Blot&fromid=9884710&fr=aladdin

2.https://baike.baidu.com/item/Tween20/2285916?fr=aladdin

3.https://baike.baidu.com/item/PBS%E7%BC%93%E5%86%B2%E6%B6%B2/8954229?fr=aladdin&fromtitle=%E7%A3%B7%E9%85%B8%E7%9B%90%E7%BC%93%E5%86%B2%E6%B6%B2&fromid=10979930

4.https://zhidao.baidu.com/question/42373232.html