细胞培养知识点

DAPI

即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，是一种能够与DNA强力结合的荧光染料，常用于荧光显微镜观测.
因为DAPI可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。（流式检测荧光病毒感染细胞时加DAPI去死活）

三抗

有些抗生素会在一周内降解，培养基最好现用现配。

丙酮酸钠

丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢丙酮酸钠。

谷氨酰胺

几乎所有的细胞对谷氨酰胺都有较高的要求。谷氨酰胺脱掉氨基后，可作为培养细胞的能量来源，参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。所以，各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置-20℃冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4度冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。

GlutaMAX-Ⅰ

GlutaMAX-Ⅰ是一个L-谷氨酰胺的衍生物，其不稳定的a-氨基用L-丙氨酸来保护。一种肽酶逐渐裂解二肽，释放L-谷氨酰胺供利用。

GlutaMAX-Ⅰ二肽非常稳定，即使在121℃灭菌20min， GlutaMAX-Ⅰ二肽溶液有最小的降解；而在相同条件下，L-谷氨酰胺几乎完全降解。

L-谷氨酰胺在细胞培养时是重要的，但其在溶液中不稳定，经过一段时间后会降解，确切的降解率一直没有最终确定。L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成，而氨对于一些细胞具有毒性。因此GlutaMAX-Ⅰ是细胞培养中谷氨酰胺的替代品

NaHCO3的作用

与CO2一起形成缓冲系统，保持培养基PH值稳定。

NRDC基因

在细胞表面,NRDc能够结合HB-EGF并能促进其诱导的细胞迁移。 NRDc基因敲除的小鼠,大部分在出生后48小时内死亡,神经系统发育滞后。 我们研究发现,NRDc是第一个特异结合组蛋白H3K4me2的蛋白,并且具有调控基因转录的功能。

Dispase II-分散酶II

中文名分散酶II，一种非特异性金属蛋白酶，细胞生物学中常被用来从各种不同组织或器官中消化细胞外基质，释放并制备原代单细胞；或用于细胞培养中的细胞收获或接种转移；也被用于防止悬浮细胞培养时的细胞意外结团。，如原代细胞的分离，细胞传代等。另外，Dispase II还可用于消除悬浮细胞培养过程中发生的细胞聚集。与其他细胞生物学常用蛋白酶（如胰蛋白酶、胶原酶、链霉蛋白酶等）相比，该酶具有以下优势：1）一种快速有效且温和的细胞消化酶，对细胞损伤小，且能维持细胞膜完整性；2）来源于细菌，无支原体或其他动物病毒污染；3）稳定性强，不受温度、pH及血清组分的影响；4）可用于多种类型组织和细胞的分离等。
本品非无菌Dispase II，来源于Bacillus polymyxa，使用时需对其除菌处理，用于细胞培养时常用工作浓度为0.6-2.4 U/mL。

Accutase™-细胞消化液

是包含蛋白水解酶和胶原酶活性的一种细胞消化液，是胰酶/EDTA消化液的完美替换产品，用于从常规组织培养器皿和粘附培养器皿中消化细胞，消化为单个细胞。与传统的胰酶消化液相比，本品具有以下优势：
1）适用于绝大多数原代细胞和哺乳动物细胞系的消化，以及昆虫细胞；
2）温和有效的消化干细胞（hESCs和mESCs），冻存后细胞具更高复苏率；
3）几分钟内实现粘附细胞的分离，不需清洗或中和反应，节省细胞传代时间；
4）对细胞消化较为温和，能增加细胞产量和存活率；增强细胞贴壁效率；改善细胞形态和细胞生长特性等。
注意事项：Accutase™融化后4℃保存，至少2个月稳定。不可室温保存。也可分装成单次用量，放到-80 ℃冻存，有效期2年。

mTeSR™1

cGMP mTeSR™1是使用最为广泛的，用于培养人胚胎干细胞（ES 细胞）和诱导多能干细胞（hiPS 细胞）的无饲养层培养基。从iPS的生成、培养到诱导分化，使用mTeSR™1培养细胞均建立了成熟的实验流程；该培养基已在50多个国家成功用于维持上千种ES细胞系和iPS细胞系，应用此培养基的研究成果发表于顶级的多能干细胞杂志，并为干细胞研究人员提供了强大的支持。
mTeSR™1是一款高度专业化、不含血清的完全培养基。mTeSR™1培养基选用的原材料经过严格的预筛选，确保了批次间的一致性，同时为ES 和iPS细胞的无饲养层培养提供稳健的实验环境，这为研究人员提供具有高度一致性的、表型均一、未经分化的高质量ES/iPS细胞培养物提供了保障。
mTeSR1在符合cGMP质量管理体系下生产，确保最高的质量和一致性以及可重复性。

AGM-S3细胞

建立体外AGM-S3基质细胞共培养体系,以揭示AGM-S3细胞对终末分化中性.

菌落形成单位(cfu,colony forming units)

是指在琼脂平板上经过一定温度和时间培养后形成的每一个菌落，是计算细菌或霉菌数量的单位。这个单位比“菌落数”更准确地反映问题的实质。理论上，一个活细菌可以在条件合适的固体表面上形成一个菌落，但是吸附于微小颗粒上的两个以上菌体或粘连在一起的菌团可能共同形成一个菌落，而且不同环境因素作用下，细菌的生活能力各不相同，会影响其在该条件下形成菌落的能力，致使形成的菌落数远低于实际的活菌数。因此可用菌落形成单位代替以往常用的“菌落数”作为平板计数的数量单位。

ReLeSR™

消化试剂。一种无酶试剂，适用于将人胚胎干（ES）细胞或人诱导多能干（iPS）细胞集落解离为细胞聚集体，且无需对已发生分化的集落进行手工挑选。

Matrigel Basement Membrane Matrix

Matrigel是一种细胞外基质的混合物，其中包含laminin和多种生长因子，用于细胞培养。

基底胶是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出基底膜基质，其主要成分有层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、巢蛋白、肝素糖蛋白，还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。在室温条件下，基底胶聚合形成具有生物学活性的三维基质，模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，有利于体外细胞的培养和分化，可用于对细胞形态、生化功能、迁移、侵染和基因表达等的研究。
用途：培养细胞时可无需稀释直接包被，包被厚度可为0.5 mm(薄层)或1.0 mm(厚层)。Matrigel也可以在无血清培养基中稀释后用于包被培养器皿表面，根据细胞类型和应用目的确定相应Matrigel浓度。

Gentle Cell Dissociation Reagent (GCDR)

温和细胞解离试剂（GCDR）是一种无酶试剂，适用于将人胚胎干（ES）细胞或人诱导多能干（iPS）细胞解离为细胞聚集体以进行常规传代或单细胞悬浮液。它也适用于分离肠隐窝以建立肠道类器官，以及用于在传代类器官培养物时分解康宁®基质凝胶®圆顶。GCDR不含酶或其他蛋白质。

GCDR现在也在经过认证的质量管理体系下按照相关的cGMP制造，以确保可重复结果的最高质量和一致性。

Essential 8™ 培养基（E8）

基于最原始的配方，是我们成分明确、一致性高的无滋养层培养基，用于培养诱导多能干细胞（iPSC）。也可用于ESC培养。（* DOI: 10.1111/cpr.13002）

STEMdiff™ APEL™

人多能干细胞基础培养基，是完全确定的、不含血清和动物源成份的培养基，用于人ES和iPS细胞的分化。它是基于AndrewElefanty博士发表的APEL配方（缺乏不确定的成份，如不含蛋白的杂交瘤培养基）
该培养基可用于贴壁或EB操作流程。 可与多种不同的诱导因子或细胞因子一起使用，支持外胚层，中胚层和内胚层谱系的分化。

培养基里的“四大金刚”—MEM、DMEM、1640、F-12

它们基本参与了90%以上种类细胞的培养过程。

MEM

作为带头大哥，能力非常全面，号称是应用最广泛的细胞培养液。

DMEM

作为随时紧跟老大MEM的二弟，青出于蓝而胜于蓝，浓度要高出2~4倍，可分为高糖型（含葡萄糖4500mg/L）和低糖型（含葡萄糖1000mg/L）。

1640

老三中规中矩，营养成分比较简单，比DMEM少一点糖和谷光甘肽，常用于淋巴细胞的培养。

F12培养基

起初是作为一种无血清配方设计的，常补加血清用于支持各种正常的和转化细胞的增殖。F12常和DMEM以I:I结合，称为DMEM/F12培养基，作为开发无血清配方的基础，以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分的优点。
小兄弟F12常用来支持CHO、Hela和L－细胞生长以及原代大鼠肝细胞和前列腺上皮细胞的培养。MEM和F12 这两种培养基各取1/2，即可形成神经生物学最通用的培养基。