pbl第一幕

1.     [endif]刚进实验室的时候，如何能很好的与导师交流

服从老师的安排，尽快进入课题组，和老师讲好自己未来的规划。

2.     [endif]如何处理好和师兄实际以及老师的关系

尊重理解沟通，谦虚求教，尽自己所能帮大家的忙。

3.     [endif]NAFLD的相关临床症状以及导致它的分子机制

临床症状：多无自觉症状，部分病人可有乏力、消化不良、肝区隐痛、肝脾肿大等非特异性症状及体征，可有体重超重和内脏性肥胖，空腹血糖增高，血脂紊乱，高血压等代谢综合征相关症状

分子机制：

1

2

Ref：Mechanisms of NAFLD development and therapeutic strategies

二次打击学说：脂类在肝脏细胞内的聚集（第一次打击）触发了一系列的细胞毒事件（第二次打击，导致了肝脏的炎症反应）

基因学说：SNP可能与NAFLD存在相关性；炎性细胞因子也是NAFLD的重要发生机制之-，TNF -a在肝脏的损伤和炎症反应中有重要作用。

[if !supportLists]1.     [endif]Wb图里面的各项含义

脂肪肝组和对照组，脂肪肝组Y1蛋白磷酸化增强

GAPDH是内参，对应管家基因，保证每孔上样时加入的蛋白总量是一样的

[if !supportLists]2.     [endif]ChIP-sequence的原理

染色质免疫共沉淀技术和二代测序技术，首先通过染色质免疫共沉淀技术特异性的富集目的蛋白结合的DNA片段，并对其进行纯化，将富集得到的DNA片段进行测序

3

[if !supportLists]1.     [endif]Y1蛋白磷酸化与脂质堆积是否有相互作用关系

有磷酸化伴随着脂质堆积。

[if !supportLists]2.     [endif]Y1蛋白的定位（具体是在细胞质，细胞膜上还是核内）、

免疫荧光标记法

[if !supportLists]3.     [endif]ChIP是为了检测什么

检测Y1与A1、B2的启动子区域结合情况

[if !supportLists]4.     [endif]荧光素酶对转录活性检测原理

将待测蛋白质与GAL4转录因子的DNA 结合结构域(DBD)融合, 该融合蛋白通过GAL42DBD能与荧光素酶报告基因( GAL42 LUC) 上游调控序列结合, 若待测蛋白质具有转录激活活性, 则荧光素酶基因被激活, 反之则否。

[if !supportLists]5.     [endif]质粒是如何修饰打入靶细胞

转化、转染

[if !supportLists]6.     [endif]第一幕中FFAs也是通过Y1来影响脂质堆积，两个实验是否重复了

没有，因为两次实验的目的是不一样的。第一个为了观察Y1磷酸化表达增强的现象，第二个是为了观察Y1和A1、B2的结合。

[if !supportLists]7.     [endif]兔IgG，为什么不用鼠IgG

便宜，经济实惠

[if !supportLists]8.     [endif]p值含义

显示差异是否显著，大于0.05，无显著差别

[if !supportLists]9.     [endif]Y1是否与A1 B2同时结合

酵母双杂交，将待研究的两种蛋白质分别克隆（融合）到酵母表达质粒的转录激活因子（如GAL4等）的DNA结合结构域（DNA-BD）和转录激活域（AD）上，构建成融合表达载体，从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统。

[if !supportLists]10.  [endif]设置对照的原则

阴参：对比，不出现结果

阳参：检测体系

通过对比说明问题

严谨