文献精读21.12.27

文献题目:OsSPL13 controls grain size in cultivated rice

题目翻译:OsSPL13调控栽培稻籽粒大小
杂志和影响因子:Nat. Genet(IF:38.33;Q1)
创新点(阅读理由):是由GWAS而非图位克隆首次直接克隆到的水稻粒形基因。
研究意义:找到了一个影响籽粒大小的转录因子,证明了其通过调节细胞大小来增加粒长,并且与GS3分别调控。同时也证明了GWAS可以用于挖掘新基因。
结论:

  • 通过对341个温带粳稻和40个热带粳稻共381份粳稻进行全基因组关联分析发现,在水稻第七号染色体上有一个与粳稻粒长和粒重相关的显著QTL位点,分别解释了粒长约30%的表型变异率和粒重25%的表型变异率。峰值SNP分型发现,大粒型和小粒型有极显著的差异。位于260kb的区间内有11个候选基因,通过RT-PCR分析发现只有一个gene IX 在穗子中的表达水平成显著差异。对于这个基因进行了分析。转录及蛋白表达水平有显著差异。
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  • 通过对26个小粒粳稻和21个大粒粳稻的OsSPL13基因进行了测序,发现共16个多态性和峰值SNP关联,6个SNP位于启动子区域,3个多态性位于5′ UTR,外显子上1个同义突变,内含子上2个SNP,3'UTR上1个SNP和3个INDELs。我们构建了3个转基因结构体——构建体I (OsSPL13SGH)、构建体CP (OsSPL13LGH)和构建体III (pOSPL13SGH::OsSPL13LGH),结果发现,启动子变化并不影响表型,进一步构建转基因系说明,一个串联重复序列是导致其表达水平下降,粒长减少。

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  • 通过RNA干扰对抑制OsSPL13的表达,发现对应的转基因植株粒长和粒重显著减小。利用T-DNA插入创建了一个glw7的突变体,该突变体的粒重、粒长、粒厚都显著降低,用野生型互补能完全恢复表型。粒长的该基因的转录水平与蛋白的水平也高。转基因株系中灌浆速率也有极显著的差异,说明该基因参与干物质的积累。

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  • 转基因株系的小穗发育也有差异。携带该基因的穗长、分枝数、每穗粒数都比野生型的要高。


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  • glw7突变体的谷壳高中低三部分的每毫米细胞数目都显著高于其他材料。说明OsSPL13是通过调控细胞大小来实现粒长增加的。

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  • 在小花花序发育过程中的OsSPL13的表达变化,与之前的相一致。

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  • FST群体分化指数分析,在GLW7位点上热带粳稻和籼稻的亲缘关系较近,说明OsSPL13可能是由籼稻渗透到热带粳稻的。
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