ELISpot与传统ELISA区别,以及ELISpot试剂盒研究

酶联免疫斑点实验 (ELISpot) 是一种可用于对96孔板内的一百万个细胞中实现对单个分泌细胞进行定量检测的实验方法。高灵敏度的ELISpot是一种检测数量稀少的细胞因子分泌细胞 (30万个细胞中才存在1个) 的强效技术,并被广泛应用于癌症研究,疾病探索以及疫苗研发等领域。

ELISpot与传统ELISA区别(艾美捷整理如下):

ELISpot与传统ELISA区别,以及ELISpot试剂盒研究_第1张图片

ELISpot实验步骤与原理示意 (示意图如下)

大致原理上分为如下7个步骤,详情已具体产品说明书为准

Step.1 包被:将单克隆捕获抗体添加到乙醇处理的PVDF膜板上

Step.2 细胞孵育:在有刺激的情况下加入细胞,孵育,细胞分泌细胞因子

Step.3 捕获分泌物:激活后的细胞,分泌的细胞因子被周围的抗体结合捕获

Step.4 检测抗体:去除细胞,清洗平板,加入生物素化的检测抗体

Step.5 链霉亲和素-酶偶联物:加入链霉亲和素偶联物,保证后续在膜上形成斑点

Step.6 加反应底物:当酶催化时,显色底物形成不溶性沉淀

Step.7 结果分析:在自动点阅读器中对结果进行分析。每个斑点对应一个分析物分泌细胞

 

如何挑选合适的ELISpot试剂盒

针对不同的研究需要,使用不同格式的ELISpot试剂盒,从ELISpotBASIC到完整的ELISpotPRO试剂盒。

艾美捷建议,根据用户偏好,比如想要设置和优化实验,开发kit的用户,可使用ELISpot基础自开发款,大部分客户的选择:ELISpotPLUS预包被,想要zui短的时间,就选ELISpotPRO一步法。

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